Derivatisasi melibatkan suatu reaksi kimia antara suatu analit dengan suatu reagen untuk mengubah sifatfisika-kimia suatu analit. Tujuan utama penggunaan derivatisasi pada KCKTadalah untuk:
1.Meningkatkan deteksi
2.Merubah struktur molekul atau polaritas analit sehingga akan menghasilkan puncak kromatografi yang lebih baik
3.Merubah matriks sehingga diperoleh pemisahan yang lebih baik
4.Menstabilkan analit yang sensitif3.
Detektoryang paling banyakdigunakandalam KCKTadalah detektor UV-Vis sehingga banyak metode yang dikembangkan untuk memasang atau menambahkan gugus kromoforyang akan menyerap cahaya pada panjang gelombang tertentu. Di samping itu, juga dikembangkan suatu metode untuk menghasilkan fluorofor (senyawa yang mamapu berfluoresensi) sehingga dapat dideteksi dengan fluorometri17'.
Suatu reaksi derivatisasi harus mempunyai syarat-syarat sebagai berikut, yakni: produk yang dihasilkan harus mampu menyerap baik sinar ultraviolet atau sinar tampak atau dapat membentuk senyawa berfluoresen sehingga dapat dideteksi dengan spektrofluorometri;
proses derivatisasi harus cepat dan menghasilkan produk yang sebesar mungkin (100 %); produk hasil derivatisasi harus stabil selama proses derivatisasi dan deteksi; serta sisa pereaksi untuk derivatisasi harus tidak mengganggu pemisahan kromatografr71.
Berbagai macam agen penderivat telah tersedia sebagaimana ditunjukkan olehTabel 4.4.
Derivatisasi ini dapat dilakukan sebelum analit memasuki kolom (pre-column clerivatization] atau setelah analit keluar dari kolom (post-column clerivatization).
Sumber :
Rohman, Abdul. 2009. Kromatigrafi Untuk Analisis Obat. Yogyakarta:
Tidak ada komentar:
Posting Komentar